简述单克隆抗体制备的原理。

题目
问答题
简述单克隆抗体制备的原理。
如果没有搜索结果或未解决您的问题,请直接 联系老师 获取答案。
相似问题和答案

第1题:

简述单克隆抗体的制备原理。


正确答案:B淋巴细胞在抗原的刺激下,能够分化、增殖形成具有针对这种抗原分泌特异性抗体的能力。B细胞的这种能力和量是有限的,不可能持续分化增殖下去,因此产生免疫球蛋白的能力也是极其微小的。将这种B细胞与非分泌型的骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,再进一步克隆化,这种克隆化的杂交瘤细胞是既具有瘤的无限生长的能力,又具有产生特异性抗体的B淋巴细胞的能力,将这种克隆化的杂交瘤细胞进行培养或注入小鼠体内即可获得大量的高效价、单一的特异性抗体。这种技术即称为单克隆抗体技术。

第2题:

简述单克隆抗体的制备过程。


参考答案:经筛选和克隆化的杂交瘤细胞仅能合成及分泌单一抗原表位的特异性抗体,是单克隆抗体。单抗的制作过程大体分为抗原的制备,动物的免疫,b细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,筛选杂交瘤细胞,筛选能产生某种特异性单抗的杂交瘤细胞,杂交瘤细胞的克隆化,体外大规模培养或动物腹腔培养特异性杂交瘤细胞克隆,单抗的纯化及鉴定。

第3题:

简述渗透泵型控释片剂控释原理及制备关键。


正确答案:渗透泵片原理与构造为:①片芯为水溶性药物和水溶性聚合物或含有其他辅料。②外包有不溶性半渗透膜壳,水可渗透进人,药物不能渗透出。③片剂的一侧壳项用适当方法(如激光)开一小孔,当水通过半透膜进入片芯后,药物溶解成饱和溶液,由于渗透压的差别,药物由小孔释放药物,直至膜内外渗透压平衡。半透膜的厚度,孔径和孔率,片芯处方及释药小孔的直径是制备渗透泵型片剂的关键,释药小孔直径小,释药慢,反之则快。

第4题:

简述非晶态材料的制备原理 


正确答案: (1)获得非晶态材料的根本条件
——足够快的冷却速度,并冷却到材料的再结晶温度以下。
(2)制备非晶态材料需解决的两个技术关键:
A.必须形成分子或原子混乱排列的状态;
B.将热力学亚稳态在一定范围内保存下来,并使之不向晶态转变。

第5题:

简述块体纳米材料的制备方法原理


正确答案: 外压力合成法:
(1)惰性气体凝聚原位加压成形法
(2)高能机械研磨法  
(3)电解沉积法   
相变界面成形法:
非晶晶化法  
大塑性变形法(粉末冶金法,高温、高压法) 
电解沉积法原理:电解沉积法是指在溶液中带正电的金属离子,吸附到带负电的纳米颗粒表面,然后在电动力的作用下移至阴极,金属离子还原成原子,并与所俘获的纳米颗粒一起占据阴极金属或合金表面的位置,而形成涂层,逐渐形成薄膜纳米材料。 
非晶晶化法原理:非晶晶化法是通过控制非晶态固体的晶化动力,来获得块体纳米材料的方法,它包括非晶态固体的获得和晶化两个过程。 
大塑性变形法原理:它是材料在准静态压力作用下自身发生严重塑性变形,从而将材料的晶粒尺寸细化到亚微米级或纳米数量级。 
粉末冶金法原理:粉末冶金法是把纳米粉压实成实体,然后放到热压炉中烧结。 
高温、高压法原理:高温、高压法是将真空电弧炉熔炼的样品置入高压腔体内,加压至数GPa后升温,通过高压抑制原子的长程扩散及晶体的生长速率,从而实现晶粒的纳米化 ,然后再从高温下固相淬火以保持高温、高压组织。

第6题:

简述单克隆抗体的制备过程及原理。


正确答案:基本原理:小鼠骨髓瘤细胞在体外适当条件下可无限增殖,但不能分泌抗体,而抗原免疫小鼠的脾细胞(B细胞)能产生抗体,但不能在体外无限增值。将两种细胞融合和就同时具有了无限增殖和分泌抗体的功能。
过程:将上述骨髓瘤细胞与免疫的B细胞融合后,用含HAT(黄嘌呤(H)、氨基蝶呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T))的选择培养基进行培养,未融合的脾细胞因不能在体外无限增值而死亡,未融合的骨髓瘤细胞因缺乏此黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT),不能利用此黄嘌呤而死亡。融合成功的杂交瘤细胞经筛选和克隆化建株,可获得能够产生某种特异性抗体的杂交瘤细胞。

第7题:

试述制备单克隆抗体的原理是什么?用到的动物细胞工程技术手段有哪几种?单克隆抗体的特点有哪些?


正确答案:单克隆抗体的原理:要制备单克隆抗体需先获得能合成专一性抗体的单克隆B淋巴细胞,但这种B淋巴细胞不能在体外生长。而实验发现骨髓瘤细胞可在体外生长繁殖,应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与免疫的淋巴细胞二者合二为一,得到杂种的骨髓瘤细胞。这种杂种细胞继承两种亲代细胞的特性,它既具有B淋巴细胞合成专一抗体的特性,也有骨髓瘤细胞能在体外培养增殖永存的特性,用这种来源于单个融合细胞培养增殖的细胞群,可制备一种抗原决定簇的特异单克隆抗体。
手段:(1)灌注悬浮培养:连续灌注新的培养基,同时连续排出旧的培养液了,使细胞在一个相对稳定的环境中生长和繁殖,可提高细胞密度10倍以上
(2)贴壁细胞培养:由于大部分动物细胞无细胞壁,进行细胞培养时必须附在固体或半固体表面上培养,在固体载体表面上生长,并扩成一单层,称为单层培养法
(3)固定化细胞培养:采用载体使整个细胞固定化
单克隆抗体的特点:
(1)单克隆抗体是针对单一抗原决定的化学结构完全相同的单一抗体,其特异性强,与其对应抗原的亲和力高度均一
(2)制备时无需将抗原纯化,适于由未纯化的抗原大量制备。
(3)杂种瘤细胞株可冷冻于液氮中长期保存,所以单克隆抗体可以重复稳定的制备,不会因批号的不同而产生差异,只要使用来自同样杂交瘤的单克隆抗体,就能够以同一标准比较各研究室的数据。

第8题:

简述单克隆抗体的制备过程及相关原理。


正确答案:基本原理:小鼠骨髓瘤细胞在体外适当条件下可无限增殖,但不能分泌抗体,而抗原免疫小鼠的脾细胞(B细胞)能产生抗体,但不能在体外无限增值。将两种细胞融合和就同时具有了无限增殖和分泌抗体的功能。过程:将上述骨髓瘤细胞与免疫的B细胞融合后,用含HAT(黄嘌呤(H)、氨基蝶呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T))的选择培养基进行培养,未融合的脾细胞因不能在体外无限增值而死亡,未融合的骨髓瘤细胞因缺乏此黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT),不能利用此黄嘌呤而死亡。融合成功的杂交瘤细胞经筛选和克隆化建株,可获得能够产生某种特异性抗体的杂交瘤细胞。

第9题:

简述单晶材料制备中定向凝固法原理。


正确答案: (1)本质上,定向凝固法是借助在一个温度梯度内进行结晶,从而在单一的固-液界面上成核。
(2)要结晶的材料通常放在一个圆柱形的坩埚内,使该坩埚下降通过一个温度梯度,或者使加热器坩埚上升。通常把坩埚固定在一个设计得能产生近似一线性梯度的温度的炉子内,然后冷炉子

第10题:

什么是单克隆抗体?简述制备步骤。


正确答案: 单克隆抗体是指由一纯系B淋巴细胞克隆,经分化、增殖后的浆细胞所产生的单一成分、单一特异性的免疫球蛋白分子。步骤:
①选择亲本细胞株。骨髓瘤细胞必须选用HGPRT酶缺陷型,因为它们不能在HAT培养基上生长。B细胞是用绵羊红细胞免疫小白鼠,在脾脏内形成激活的B淋巴细胞后,再取脾,制成B细胞悬液。
②混合双亲细胞。将上述两种细胞以合适比例混合。
③促进细胞融合。可用PEG或仙台病毒促融。
④淘汰未融合细胞。处理后的细胞分装在塑料板微孔内,在HAT选择性培养液中培养,未融合的细胞因不能合成核酸死亡,存活者为融合细胞,经产物鉴定后,留下优良的单克隆抗体生产株。
⑤杂交瘤细胞的扩大培养。可通过注射入动物体内增殖,也可在组织培养瓶或细胞培养罐内做扩大培养。