问答题简述Sanger DNA测序法的原理。

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简述Sanger DNA测序法的原理。

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第1题：

目前自动化测序的基本原理是基于

A、链末端终止法

B、化学降解法

C、生物质谱法

D、杂交测序法

E、全新的测序原理

参考答案：A

第2题：

Sanger双脱氧终止法对DNA测序时,下列哪种核苷酸的加入会使DNA链延长终止()

A、dGTP

B、dTTP

C、dCTP

D、Datp

参考答案：C

第3题：

Sanger法测序的待测模板包括

A、单链DNA

B、双链DNA

C、单链RNA

D、双链RNA

E、任意核酸

参考答案：AB

第4题：

DNA杂交测序法

正确答案:是利用杂交技术来测定DNA序列的方法。其基本原理是用一套已知序列、长度特异、具有所有可能的碱基序列的寡核苷酸探针，与未知序列的待测DNA片段进行分子杂交，然后根据寡核苷酸探针完全杂交互补的情况推知待测DNA的碱基序列。

第5题：

简述几种DNA测序的方法，比较优缺点。

正确答案: 1.Sanger双脱氧连终止法；2.Maxam-Gilbert化学降解法；3.DNA自动测序化。
Maxam-Gilbert法所能测定的长度要比Sanger法短一些，它对放射性标记末端250个核苷酸以内的DNA序列效果最佳。Sanger法需要单链模板和特异寡核苷酸，并需获得大肠杆菌DNA聚合酶IKlenow片段的高质量酶制剂，而Maxam-Gilbert法只需简单化学试剂。随着M13噬菌体和噬菌粒载体的发展，也由于现成的合成引物唾手可得及测序反应日臻完善，双脱氧链终止法如今远比Maxam-Gilbert法应用得广泛。化学降解较之链终止法具有一个明显的优点：所测序列来自原DNA分子而不是酶促合成所产生的拷贝。因此，利用Maxam-Gilbert法可对合成的寡核苷酸进行测序，可以分析诸如甲基化等DNA修饰的情况。由于Sanger法既简便又快速，因此是现今的最佳选择方案。事实上，目前大多数测序策略都是为Sanger法而设计的。

第6题：

DNA测序技术中的链末端终止法又称为

A、经典法

B、传统法

C、酶法

D、Sanger法

E、自显影法

参考答案：CD

第7题：

Sanger建立的DNA测序技术是（）。

A、合成终止法
B、化学断裂法
C、杂交法
D、PCR法
E、基因芯片法

正确答案:A

第8题：

Sanger法的测序体系包括

A、待测模板

B、测序引物

C、RNA聚合酶

D、标记的dNTP

E、凝胶电泳

参考答案：ABDE

第9题：

目前DNA测序仪的工作原理，主要是利用（）。

正确答案:双脱氧链末端终止法和化学降解法

第10题：

简述利用双脱氧末端终止法（Sanger法）测定DNA一级结构的原理与方法？

正确答案: 原理是采用核苷酸链终止剂—2，，3，-双脱氧核苷酸终止DNA的延长。由于它缺少形成3/5/磷酸二脂键所需要的3-OH，一旦参入到DNA链中，此DNA链就不能进一步延长。根据碱基配对原则，每当DNA聚合酶需要dNMP参入到正常延长的DNA链中时，就有两种可能性，一是参入ddNTP，结果导致脱氧核苷酸链延长的终止；二是参入dNTP，使DNA链仍可继续延长，直至参入下一个ddNTP。根据这一方法，就可得到一组以ddNTP结尾的长短不一的DNA片段。
方法是分成四组分别为ddAMP、ddGMP、ddCMP、ddTMP反应后，聚丙烯酰胺凝胶电泳按泳带可读出DNA序列。

简述Sanger DNA测序法的原理。

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