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简述PCR循环测序的基本原理。

题目
问答题
简述PCR循环测序的基本原理。
参考答案和解析
正确答案： PCR技术能够快速、特异性地扩增靶DNA，应用PCR技术测定DNA序列分为两个步骤：先利用PCR扩增靶序列片段，制备测序模板，然后再利用PCR直接测定序列。PCR测序采用了热循环高效合成DNA的特性并结合双脱氧核苷酸终止法，使引物链终止的延伸产物数量在热循环过程中得到增加，因此称为循环测序。
每个测序循环包括：
①PCR扩增制备的模板DNA变性成单链形式；
②标记引物与其中的一条链上的互补序列退火；
③退火后的引物在耐热DNA聚合酶催化下发生链延伸终止反应。
本次循环产生的模板链与延伸终止链形成的双链的产物，在下一轮测序循环中，再次被变性，释放出模板链，作为又一轮引发反应的模板，同时积累下一轮循环产生的链终止产物。
上述循环步骤重复20~40次，使链终止产物以线性方式获得扩增。
解析： 暂无解析
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第1题：

目前最为常用的基因多态性检测方法是

A、PCR－SSCP

B、PCR－测序

C、PCR－RFLP

D、荧光PCR

E、原位PCR


参考答案：C

第2题：

蛋白测序仪测定氨基酸排列顺序，DNA测序仪是测核苷酸排列顺序，能做DNA测序的物质是( )。

A、质粒

B、噬菌体

C、PCR产物

D、DNA

E、A+B+C


参考答案：E

第3题：

能做PCR的仪器

A.蛋白测序仪

B.DNA测序仪

C.DNA扩增仪

D.读胶仪

E.质谱仪


正确答案：C

第4题：

简述PCR循环测序的基本原理。


本题答案：PCR技术能够快速、特异性地扩增靶DNA，应用PCR技术测定DNA序列分为两个步骤：先利用PCR扩增靶序列片段，制备测序模板，然后再利用PCR直接测定序列。PCR测序采用了热循环高效合成DNA的特性并结合双脱氧核苷酸终止法，使引物链终止的延伸产物数量在热循环过程中得到增加，因此称为循环测序。
每个测序循环包括：
①PCR扩增制备的模板DNA变性成单链形式;
②标记引物与其中的一条链上的互补序列退火;
③退火后的引物在耐热DNA聚合酶催化下发生链延伸终止反应。
本次循环产生的模板链与延伸终止链形成的双链的产物，在下一轮测序循环中，再次被变性，释放出模板链，作为又一轮引发反应的模板，同时积累下一轮循环产生的链终止产物。
上述循环步骤重复20~40次，使链终止产物以线性方式获得扩增。

第5题：

细胞粘附分子基因的多态性测定的验证方法是 ( )

A、PCR-SSCP

B、PCR-RFLP

C、实时荧光PCR方法

D、PCR-直接测序法

E、时间分辨荧光免疫测定法


参考答案：D

第6题：

目前自动化测序的基本原理是基于

A、链末端终止法

B、化学降解法

C、生物质谱法

D、杂交测序法

E、全新的测序原理


参考答案：A

第7题：

细胞粘附分子基因的多态性测定方法有 ( )

A、PCR-SSCP

B、PCR-RFLP

C、实时荧光PCR方法

D、PCR-直接测序法

E、时间分辨荧光免疫测定法


参考答案：ABCD

第8题：

淋病奈瑟菌耐药检测技术包括()

A.DNA测序

B. PCR-SSCP

C. PCR-RDB

D.基因芯片技术


正确答案：ABD

第9题：

链末端终止法中的PCR循环测序法采用的DNA聚合酶是

A、大肠埃希菌DNA聚合酶

B、Klenow片段

C、测序酶

D、序列酶

E、Taq DNA聚合酶


参考答案：E

第10题：

简述PCR基本原理。


本题答案：PCR技术是模拟生物体内DNA的半保留复制，在体外合成DNA链的方法，在模板、DNA、引物、dNTP、Taq酶存在的条件下经过：
“高温变性→低温退火→中温延伸”三步循环，获得大量扩增片段。

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